Ki-67 expression score correlates to survival rate in gastrointestinal stromal tumors (GIST) / Escore de expressão de Ki-67 correlaciona-se com taxa de sobrevida em tumores estromais gastrointestinais (GIST)

PURPOSE: To evaluate the immunohistochemical expression of p16, Ki-67, p53 and Bcl-2 proteins in gastrointestinal stromal tumors (GIST); to assess the possible association between these variables and clinical and histopathological factors of cancer; and to check for prognostic value of these variables (survival and recurrence). METHODS: A sample of 55 patients treated surgically for GIST in three hospitals was studied. The surgically excised tumors were confirmed as GIST by KIT, vimentin, desmin S100 protein, CD117, 1A4 and CD34 assessment in paraffin blocks. RESULTS: Only 9 (16%) cases of GIST were positive for p53, p16 was positive among 43.6%; 80% of GISTs showed staining for Bcl-2. The proliferative index (expressed as the proportion of positive cells) assessed by immunohistochemical expression of Ki-67 was high in 49% of cases. Elevated Ki-67 scores were associated to high histological grade (p=0.0026) and mitosis index, MI (p=0.0001). High Ki-67 index was associated to death. Expression of p53, p16 and Bcl-2 did not correlate to morphological or clinical variables. CONCLUSIONS: Ki-67 immunohistochemical evaluation should be included in preoperative evaluation of GIST biopsies or surgical specimens as a prognostic tool for clinical staging; and all other proteins studied (Bcl-2, p53 and p16) did not play a role in GIST metabolic or carcinogenic process, remaining without prognostic value.

OBJETIVO: Avaliar a expressão imunoistoquímica de p16, Ki-67, p53 e Bcl-2 proteínas em tumores gastrointestinais estromais (GIST); determinar a possível associação entre essas variáveis e fatores clínicos e histopatológicos de câncer, e para verificar o valor prognóstico destas variáveis (sobrevivência e recorrência). MÉTODOS: Uma amostra de 55 pacientes tratados cirurgicamente para GIST em três hospitais foi estudada. Os tumores extirpados cirurgicamente foram confirmados como GIST por KIT, vimentina, proteína desmina S100, CD117, 1A4 e avaliação de CD34 em blocos de parafina. RESULTADOS: Apenas nove (16%) casos de GIST foram positivos para p53, p16 foi positiva em 43,6%, 80% dos GIST apresentaram coloração para Bcl-2. O índice proliferativo (expresso como a proporção de células positivas), avaliado pela expressão imunoistoquímica de Ki-67, foi elevado em 49% dos casos. Escores de Ki-67 elevados foram associados com alto grau histológico (p=0,0026) e índice de mitose, MI (p=0,0001). Alto índice de Ki-67 foi associado à morte. Expressão da p53, p16 e Bcl-2 não se correlacionou com as variáveis morfológicas ou clínicas. CONCLUSÕES: A avaliação imunoistoquímica de Ki-67 deve ser incluída na avaliação pré-operatória de biópsias ou peças cirúrgicas de GIST como uma ferramenta prognóstica para o estadiamento clínico, e todas as outras proteínas estudadas (Bcl-2, p53 e p16) não desempenharam um papel no processo metabólico ou carcinogênico em GIST, mantendo-se sem valor prognóstico.

Prevalence of c-myc expression in breast lesions associated with microcalcifications detected by routine mammography / Expressão de c-myc em lesões mamárias associadas a microcalcificações detectadas por mamografia de rotina

CONTEXT AND OBJECTIVE: Genetic abnormalities in cell proliferation-regulating genes have been described in premalignant lesions. The aims here were to evaluate c-myc protein expression in non-palpable breast lesions associated with microcalcifications, detected by screening mammography, and to compare these results with histopathological, clinical and epidemiological variables. DESIGN AND SETTING: Analytical cross-sectional study, with retrospective data collection, in a university hospital in São Paulo. METHODS: Seventy-nine female patients who underwent routine mammography between 1998 and 2004 were studied. Lesions classified by the Breast Imaging Reporting and Data System (BI-RADS) as 4 or 5 underwent percutaneous biopsy using a large-core needle. Ninety-eight lesions were studied anatomopathologically. Paraffin blocks properly representing the lesions were selected for immunohistochemical analyses using the streptavidin-biotin-peroxidase technique with monoclonal mouse c-myc antibodies. RESULTS: Among the 98 lesions, 29 (29.6 percent) contained malignant neoplasia; 40 (40.8 percent) had a positive immunohistochemical reaction for c-myc. When the groups were divided between lesions without atypias versus atypical lesions plus malignant lesions, 31.03 percent of the 58 lesions without atypias were positive for c-myc and 55 percent of the 40 malignant and atypical lesions (P = 0.018). Comparing the atypical lesions with ductal carcinoma in situ versus the benign lesions without atypias, c-myc was present in 51.61 percent of the 31 atypical lesions and 31.03 percent of the benign lesions without atypias (P = 0.057). CONCLUSION: C-myc protein was more frequently expressed in atypical and malignant lesions than in benign lesions without atypias. C-myc expression correlated with the presence of atypias (P = 0.018).

CONTEXTO E OBJETIVO: Alterações nos genes reguladores da proliferação celular foram descritas em lesões pré-malignas. Os objetivos foram avaliar a expressão da proteína c-myc em biópsias de lesões mamárias não-palpáveis associadas a microcalcificações detectadas em mamografias de rastreamento e comparar estes resultados com as variáveis histopatológicas, clínicas e epidemiológicas. DESENHO E LOCAL: Estudo retrospectivo, em um hospital universitário em São Paulo. MÉTODOS: Setenta e nove pacientes do sexo feminino submetidas a mamografia de rotina de 1998 a 2004 foram estudadas. As lesões classificadas pelo sistema BI-RADS (Breast Imaging Reporting and Data) como 4 e 5 sofreram biópsias percutâneas com agulha grossa. Do ponto de vista anatomopatológico, foram estudadas 98 lesões. Os blocos com representação adequada para estudo imunoistoquímico com a técnica da estreptoavidina-biotina-peroxidase com o anticorpo monoclonal de camundongo c-myc foram incluídos. RESULTADOS: Das 98 lesões, 29 (29,6 por cento), continham neoplasia maligna; 40 (40,8 por cento) tiveram reação de imunoistoquímica positiva para o c-myc. Quando divididos os grupos em lesões sem atipia versus lesões atípicas mais lesões malignas, encontramos o c-myc positivo em 31,03 por cento das 58 lesões sem atipias e 55 por cento das 40 lesões atípicas e malignas (P = 0,018). Quando agrupamos as lesões atípicas com o carcinoma ductal in situ (CDIS) versus as lesões benignas sem atipias, observamos a presença do c-myc em 51,61 por cento das 31 lesões atípicas e 31,03 por cento das lesões benignas sem atipias (P = 0,057). CONCLUSÃO: A proteína c-myc está mais frequentemente expressa em lesões atípicas e malignas do que em lesões benignas sem atipia. A expressão do c-myc está correlacionada com a presença de atipia (P = 0,018).

Efficacy of estriol in inhibiting epithelial proliferation in mammary fibroadenoma: randomized clinical trial

CONTEXT AND OBJECTIVE: Mammary fibroadenoma is a disease that affects a large number of women of reproductive age. The aim of this study was to evaluate the proliferative activity of mammary fibroadenoma through expression of Ki-67 and c-myc antigens, following administration of oral contraceptive with or without estriol. DESIGN AND SETTING: Placebo-controlled double-blind randomized clinical trial in the Mastology Sector of the Department of Gynecology, Universidade Federal de São Paulo. METHODS: Thirty-three fibroadenoma patients were studied. Ten women (group 1) took an oral contraceptive constituted by levonorgestrel and ethinyl estradiol together with placebo manufactured in the same capsule for four consecutive cycles with a seven-day interval between them. The other 23 patients (group 2) took the same oral contraceptive together with estriol, which was put into the same capsule and used in the same way as among the group 1 patients. After four cycles, the nodules were surgically removed and sent for immunohistochemical analysis of Ki-67 and c-myc expression. RESULTS: The Ki-67 and c-myc analysis did not reveal any significant differences between the study groups. The values were 9.16 and 10.54 for group 1 and 10.86 and 17.03 for group 2, respectively. There was a tendency towards higher expression of antigens in group 2. CONCLUSION: Our results showed that there was no significant statistical difference in Ki-67 and c-myc expression between our study groups, but only a tendency towards higher expression among users of oral contraceptives containing estriol.

CONTEXTO E OBJETIVO: O fibroadenoma mamário é uma doença que atinge um grande número de mulheres na idade reprodutiva. O objetivo foi avaliar a atividade proliferativa do fibroadenoma mamário, através da expressão do Ki-67 e do c-myc, após a administração de anticoncepcional oral, associado ou não ao estriol. TIPO DE ESTUDO E LOCAL: Ensaio clínico randomizado, duplo-cego, placebo controlado, realizado na Universidade Federal de São Paulo a nível terciário. MÉTODOS: Foram estudadas 33 pacientes portadoras de fibroadenoma, atendidas no setor de Mastologia da Disciplina de Ginecologia da Universidade Federal de São Paulo - Escola Paulista de Medicina (Unifesp-EPM), sendo que 10 mulheres constituíram o grupo 1, e utilizaram anticoncepcional oral composto de levonorgestrel e etinilestradiol, associados a placebo na mesma cápsula por quatro ciclos consecutivos, com intervalo de sete dias entre cada um. As restantes 23 pacientes alocaram-se no grupo 2 e ingeriram, além do anticoncepcional oral descrito acima, um comprimido de estriol, que foi manufaturado na mesma cápsula e foi utilizado da mesma forma que nas pacientes do grupo 1. Ao final dos quatro ciclos, praticou-se a exérese cirúrgica dos nódulos, com posterior envio para análise imunoistoquímica de Ki-67 e c-myc. RESULTADOS: A análise com Ki-67 e c-myc não revelou diferença significante entre os grupos estudados, que foi de 9,16 e 10,54 no grupo 1 e de 10,86 e 17,03 no grupo 2, respectivamente, apesar de ter havido tendência a maior expressão dos marcadores entre as pacientes do grupo 2. CONCLUSÃO: Nossos resultados demonstram não haver diferença estatisticamente significante na expressão de Ki-67 e de c-myc entre os grupos em estudo, apenas uma tendência a sua maior expressão entre as usuárias de anticoncepcional e estriol.

Estudo piloto dos efeitos da terapia hormonal sobre o tecido mamário normal de mulheres após a menopausa / A pilot study of the effects of hormone therapy on normal breast tissue of postmenopausal women

OBJETIVOS: avaliou-se o tecido mamário de mulheres antes e depois de seis meses de terapia estroprogestativa combinada contínua (0,625 mg de estrogênios conjugados eqüinos associados a 2,5 mg de acetato de medroxiprogesterona). MÉTODOS: todas as pacientes foram avaliadas antes de se instituir o tratamento e consideradas aptas para este. Foram obtidos fragmentos de tecido mamário por meio de biópsia percutânea com agulha grossa (acoplada a um propulsor automático - "core-biópsia"). O material foi fixado e os cortes corados por hematoxilina-eosina. Avaliou-se a densidade epitelial e o volume nuclear do epitélio mamário antes e após a terapia hormonal. Esses parâmetros morfométricos foram analisados graficamente com auxílio do programa Imagelab 2000 ®, após captura da imagem microscópica pelo sistema Vidcap 32. Esse programa permite que sejam selecionadas as áreas de interesse, possibilitando o cálculo de área, volume ou a relação da área ocupada entre diferentes estruturas. RESULTADOS: depois do uso da terapia, o volume nuclear nas mulheres em que o tratamento foi instituído em período mais tardio após a menopausa mostrou um aumento de cerca de 33 por cento (de 103,6 para 138,1 æm³). A densidade epitelial não se modificou de forma significativa: o valor médio antes da terapia hormonal foi de 0,08 e após de 0,10. CONCLUSÕES: a terapia estroprogestativa combinada contínua empregada por seis meses induziu à alteração no volume nuclear das células epiteliais das mamas, sugerindo aumento de sua atividade metabólica. Provavelmente, esse evento precede outros que confirmariam o estímulo da proliferação celular por esses hormônios.

PURPOSE: to analyze breast tissue of postmenopausal women before and after six months of continuous combined estrogen-progestin replacement therapy (0.625 mg conjugated equine estrogens associated with 2.5 mg medroxyprogesterone acetate). METHODS: all patients were evaluated before treatment and considered eligible to receive the drug. The material was obtained from the upper outer left quadrant, through a percutaneous large-core breast biopsy. Epithelial density and nuclear volume on hematoxylin-eosin-stained plates were evaluated for the morphological study. Morphometry was graphically analyzed by optical microscopy (400X) after acquisition of image by a digital image-capturing system (Vidcap 32) and image analysis system (Imagelab 2000 Software®). RESULTS: after six months of estrogen-progestin replacement therapy, there was a significant increase in nuclear volume in late postmenopausal women (103.6 to 138.1 æm³). There was no difference in epithelial density with the treatment (before 0.08 and later 0.10). CONCLUSIONS: estrogen-progestin combined replacement therapy for six months induced an enhacement in nuclear volume of breast epithelial cells, suggesting an increase in their metabolic activity. However, it is important to emphasize that this finding was observed only in late postmenopausal women. The increased nuclear volume could precede other events that confirm the stimulation of cellular proliferation by these hormones.

Carcinoma ductal in situ: classificação e recomendações ao patologista cirúrugico / In situ ductal carcinoma: classification and guidelines for the surgical pathologist

Com o advento da mamografia preventiva de rotina, o diagnóstico de lesões precoces e de carcinoma ductal in situ da mama tem aumentado progressivamente nos últimos 10 anos. A classificação do carcinoma ductal in situ obedece basicamente parâmetros morfológicos como atipia e presença de necrose. No entanto, várias classificações diferentes foram propostas ao longo dos anos, com abordagens nem sempre equivalentes. Neste trabalho, abordamos criticamente as diferentes classificações disponíveis em ordem cronológica de aparecimento e sua aplicabilidade na rotina diagnóstica e terapêutica destas lesões.

In the past ten years, the introduction of screening mammography in breast cancer detection progressively increased the rate of diagnosis of premalignant lesions, such as in situ ductal carcinoma of the breast. Classification of in situ ductal carcinoma basically obeys morphological parameters, such as presence of atypia or necrosis. However, multiple different classifications have been proposed by distinct groups, with not always comparable approaches. In this review, we enlist the main working classifications available chronologically disposed along with diagnosis and therapeutic remarks, their applicability and reproducibility.

Nódulos mamários: correlação entre características ultra-sonográficas e achados histológicos em 433 nódulos biopsiados / Breast nodules: correlation between ultrasound and histological findings in 433 biopsies

OBJETIVO: Determinar quais são os parâmetros ultra-sonográficos mais frequentemente relacionados a nódilos sólidos mamários com indicação cirúrgica (malignos e indeterminados) e sem indicação cirúrgica (benignos). MATERIAL E MÉTODOS: Foi realizado estudo prospectivo de 433 nódulos mamários submetidos a biópsia por agulha grossa ("core-biopsy"), correlacionando os achados ultra-sonográficos e resultados histológicos. Os parâmetros ecográficos avaliados foram: forma, margens, contornos, artefato acústico posterior e presença ou ausência de halo ecogênico. Todas as biópsias foram dirigidas por ultra-sonografia e realizadas por um examinador experiente, utilizando-se pistola de disparo automático com agulha calibre 14 Gauge. O resultado histológico foi confirmado por dois patologistas experientes e em consenso através da análise dos fragmentos obtidos. RESULTADOS: dos 433 nódulos mamários analisados, 376 (87 por cento) eram do grupo não cirúrgico (benignos) e 57 (13 por cento) eram do grupo cirúrgico (54 malignos e 3 indeterminados). Dentre os nódulos do grupo cirúrgico, 43 (75,5 por cento) apresentavam margens não circunscritas, 35 (61,4 por cento forma arredondada, 29 (50,8 por cento) apresentavam halo ecogênico, 39 (68,5 por cento) apresentavam contornos microlobulados e 34 (59,6 por cento) apresentavam sombra acústicaposterior única. Dentre os nódulos do grupo não cirúrgico, 327 (87 por cento) apresentavam margens circunscritas, 344 (91,5 por cento) tinham formato ovóide, 349 (92,8 por cento) não possuíam halo ecogênico ao redor, 317 (84,3 por cento) apresentavam contornos macrolobulados e 342 (91 por cento) apresentavam reforço acústico posterior. CONCLUSÃO: Os critérios ultra-sonográficos mais frequantes e em ordem de maior para menor frequancia nos nódulos não cirúrgicos são: margens circunscritas, formato oval, ausência de halo ecogênico, contornos macrolibulados e presença de reforço acústico posterior...

Immunohistochemical assessment of mucosal cytokine profile in acetic acid experimental colitis

O modelo de colite experimental induzida por ácido acético (CEAA) vem sendo extensamente utilizado em estudos sobre doenças inflamatórias intestinais (DII). Lesões no tecido colônico em portadores de DII parecem estar relacionados à produção local aumentada de citocinas pró-inflamatórias (IL-1, IL-6, TNF-a e IFN-g). OBJETIVO: Avaliar o padrão de expressão de citocinas identificadas por imunohistoquímica em tecido colônico após CEAA e relacioná-lo à presença de lesões macroscópicas. MATERIAL E MÉTODOS: Ratos machos Wistar adultos (n=39) foram submetidos ou não à CEAA e sacrificados para retirada do tecido colônico em dois períodos distintos, perfazendo 4 grupos aleatórios: SC45 e SC24 (sem colite; sacrifício 45 minutos e 24 horas, respectivamente); CC45 e CC24 (com colite; sacrifício 45 minutos e 24 horas, respectivamente). Avaliaram-se alterações macro e microscópicas do cólon e sua expressão de citocinas foi avaliada por imunohistoquímica. RESULTADOS: Após 24 horas, a expressão de IL-1 foi maior no grupo com colite, em relação ao sem colite. IL-4 foi mais expressa no grupo CC45. Houve aumento de INF-g e IL-6, relacionados à presença de necrose da mucosa colônica, nos grupos com colite, em ambos os períodos avaliados. CONCLUSÃO: A técnica de imunohistoquímica foi eficiente para a análise da expressão de citocinas na mucosa colônica. Houve aumento da expressão das citocinas pró-inflamatórias IL-1 e de IL-6 e IFN-g associado à presença de necrose colônica. A CEAA é um bom modelo para o desenvolvimento de estudos destinados a avaliar o papel das citocinas na inflamação da mucosa e terapias anti-citocinas.

Influencia da nutriçäo parenteral total em regime glicidico e lipidico sobre a fagocitose de macrófagos de ratos / Fat and non-fat total parenteral nutrition effect on rat's macrophage phagocytosis

O uso de emulsöes lipídicas em nutriçäo parenteral total tem sido associado a alteraçöes do sistema mononuclear fagocitário. O objetivo do presente estudo foi avaliar a influência da nutriçäo parenteral contendo diferentes emulsöes lipídicassobre a fagocitose de macrófagos (Mf). Setenta ratos Wistar com a veia jugular externa cateterizada receberam, por via intrravenosa, diferentes regimes de nutriçäo parenteral total, isocalóricos, isonitrogenados e isogordurosos ou dieta oral e foram separados em sete grupos: 1) Grupo OS: dieta oral com infusäo intravenosa de soro fisiológico a 9 porcento; 2) Grupo GLU: NPT sem lípides; 3) GrupoLCT: NPT contendo emulsäo lipídica a 10 porcento de trtiglicérides de cadeia longa (TCL); 4) Grupo LCTFO1: NPT contendo TCL e emulsäo lipídica de óleo de peixe(FO) a 10 por cento; 5) Grupo LCTFO2: contendo TCL e FO; 6) Grupo MCT: NPT contendo emulsäo lipídicaa 10 porcento com 50 porcento de triglicérides de cadeia média (TCM) e 50 porcento de TCL; 7) Grupo MCTFO1: NPT contendo TCM, TCL e FO. Após 96 horas de ministraçäo de NPT ou SF, foi injetado, pela veia caudal do rato, 1,0 Ml/kg de peso corpóreo de carväo coloidal. Após três horas os animais foram sacrificados. Fígado, baço e pulmöes forampesados e estudados por imuno-histoquímica, com o método avidina-biotina utilizando o anticorpo anti-MfHAM-56. Verificou-se microscopicamente o número total de Mf (MT) e Mf que haviam fagocitado (MF) o carväo coloidal e estabeleceu-se o índice de fagocitose. O grupo que recebeu dieta oral foi o único a ganhar peso. Em nenhum grupo observou-se diferença no peso dos órgäos. A NPT em regime glicídico e lipídico com TCL inibiu a fagocitose de Mf no fígado,baço e pulmöes. A adiçäo de emulsäo lipidica de óleo de peixe às fórmulas de NPT contendo emulsöes lipídicas de TCM e TCL aumentou o número e a fagocitose de Mf no fígado e pulmöes. Perspectivas apontam a necessidade de estudos com diferentes concentraçöes de lípides em NPT valorizando outras funçöes dos macrófagos.(au)

Influencia da nutriçäo parenteral total em regime glicidico e lipidico sobre a fagocitose de macrofagos de ratos / Effect of fat and fat free total parenteral nutrition on macrophage phagocytosis in rats

O uso de nutricao parenteral total (NPT) tem sido associado a alteracoes anatomicas e funcionais do sistema mononuclear fagocitario. Os efeitos das emulsoes lipidicas parenterais sobre a fagocitose do sistema mononuclear fagocitario ainda sao controversos. O objetivo do presente estudo foi avaliar a influencia da nutricao parenteral total sem lipides e contendo diferentes emulsoes lipidicas sobre a fagocitose de macrofagos. Setenta ratos Wistar com a veia jugular externa cateterizada receberam, por via intravenosa central, diferentes regimes de nutricao parenteral total, isocaloricos (1,16 kcal/mL), isonitrogenados (1,5 g/mL), e isogordurosos (30 a 32 por cento do valor calorico nao proteico) ou dieta oral e foram separados em sete grupos...

P53 overexpression in epidermoid carcinoma of the head and neck

The theory of field cancerization in tumors of the head and neck reflects the complex oncogenesis that occurs in this region. The mechanisms that control cell proliferation at the molecular level in epidermoid carcinomas (ECs) of the upper aerodigestive tract are still unclear. Mutations in p53 are the genetic alterations most often detected in ECs of the head and neck and seem to contribute actively to the carcinogenic process triggered by p53 as a tumor-suppressor gene and to its association with tobacco. The objective of the present study was to investigate the expression of p53 protein in epidermoid head and neck carcinomas by immunohistochemistry and its immunohistochemical correlation with other prognostic factors. The study was conducted on 63 consecutive ECs cases not submitted to previous treatment. Specimens of the tumor and of the normal adjacent mucosa were collected during surgery and submitted to immunohistochemical reaction for the determination of the expression of anti-protein p53 antibody (M7001 DAKO A/S, Denmark). Anatomo-clinical and demographic data were not significantly correlated with the presence of lymph node metastases or p53 expression in the tumor or in the adjacent normal mucosa. Tumor localization in the larynx was significantly correlated with p53 expression. Histological grading as grades I,II,III and IV was correlated whith significant p53 expression (p = 0.025). Conclusions: 1) in the studied material obtained from 63 cases of head and neck ECs, we detected a 48 percent rate of immunohistochemically detectable p53 overexpression; 2) we did not detect a relationship between demographic patient data and p53 expression in the tumor or in the normal adjacent mucosa; 3) p53 overexpression was significantly more frequent in ECs material from the larynx; and 4) The presence of 12 cases with p53 overexpression in the normal adjacent mucosa and with a p53-negative tumor is in agreement with the theory of field concerization. Follow-up of this patient series for a longer period of time will permit a better analysis of these values.